lunes, 22 de febrero de 2016

Azul Alcian (para muestras citológicas)

Azul alcian (citologías)

El colorante tienen un carácter básico y soluble en agua. Una característica interesante de está tinción es que dependiendo del pH pueden teñir diferentes tipos de polisacáridos (pH 1.0 para polisacáridos sulfatados, pH 2.5 ácidos siálicos y urónicos).
Esta tinción se utiliza para teñir polisacáridos ácidos como los que se encuentran en el cartílago y otras estructuras. Esta tinción se puede combinar con varias tinciones como las H-E, PAS y Van Gienson.
Hay que destacar que este protocolo está hecho para ser empleado en muestras citológicas, para biopsias el protocolo cambiaría.


Protocolo

  • Fijar en alcohol de 96º durante 40 minutos o 1 hora
  • Hematoxilina (de Carrazi por ejemplo) durante 5 mintutos
  • Lavar con agua 
  • Azul alcian 20' 
    • 1g de colorante
    • 97ml de agua destilada
    • 3 ml ácido acético glacial
  • Lavado con agua destilada
  • Eosina alcohólica 2 minutos
  • Deshidratar en alcoholes crecientes hasta llegar a xilol (en cada paso 5 minutos, para una mejor deshidratación).

Resultado
  • Mucinas ácidas, proteoglicanos, ácido hialurónico --> azul 
  • Glucógeno, mucinas neutras, glicoproteínas --> magenta/rojo
  • Mucinas mixtas -->purpura/azul 



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