Papanicolaou

Tinción de Papanicolaou

Descripción

Es la tinción más usada en citología tanto en muestras ginecológicas como no ginecológicas. Se utiliza para la observación del citoplasma y del núcleo de las células con la ayuda de 3 colorantes: hematoxilina de Carazzi, orange G y el EA-31. Estos colorantes no siempre nos lo vamos a encontrar pero serán similares ya que, como siempre, cada laboratorio funciona de una manera distinta. 

Los núcleos se verán teñidos por la hematoxilina de color azul.

Las células acidófilas de color rojo-naranja por el orange G

Las células basófilas de color verde-azul verdoso.

Para el uso de está tinción debe estar la muestra al menos 1h en alcohol de 96º para conseguir fijar la nuestra muestra, si bien es verdad, que cuando tenemos demasiada prisa por ver los resultados este tiempo se puede acortar a 35-45 minutos.

Fig 1. Citología vaginal con tinción de Papanicolaou, con citoplasma naranja las células superficiales, citoplasma azulado en las células intermedias y los núcleos azules. 

Protocolo

• Comenzamos con la fijación en alcohol de 96º 1h (para una fijación óptima)
• Hematoxilina de Carazzi 5 minutos
• Lavar con agua
• Orange G 5 minutos
• Lavar con agua
• EA-31 también 5 minutos 
• Lavar con agua
• Pasar a deshidratar (dependiendo del tiempo del que dispongamos lo mantendremos un tiempo u otro desde unos segundos hasta 5 minutos, 2 minutos es ideal)
• Alcohol 96º 
• Alcohol 96º
• Alcohol 100º
• Alcohol 100º
• Después de la deshidratación pasamos al xilol, donde mantendremos nuestros portas con nuestras muestras hasta que le pongamos el cubreobjetos.